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膜蛋白酵母双杂交文库筛选

DUALmembrane技术在传统的酵母双杂交系统的基础上,巧妙地利用分离的泛素系统(split-ubiquitin)进行蛋白质相互作用的筛选;泛素作为降解信号分子,人为分成两部分:N端(Nub),C端(Cub),互补重构的完整泛素分子可被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别,从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。

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膜蛋白酵母双杂系统中,Clontech SMART技术文库构建的优势
  • SMART方法与同源重组技术结合构建文库,利用酵母菌株的特点构建文库
  • AbA抗性筛选有效抑制背景生长,大大降低假阳性率
  • 优质:多种纯化方式,多重质量检测手段(HPLC、MS),全面保证我们发货的质量。
  • 文库构建菌株为α型Y187,可简便与a型菌株Y2H Gold结合生长筛选
  • 样本需求量低:相比invitrogen而言,大大降低了样本的需求量,尤其对珍贵样本
  • 样本中低丰度mRNA损失量低:相比invitrogen,无需转化到大肠杆菌进行文库保存,直接转化酵母菌株
  • invitrogen的Gateway重组技术虽然可简便转换到其他载体,但Clontech次生文库也可通过增加cDNA样本备份达到同样的目的
  • Invitrogen文库构建费用更高
 
膜蛋白酵母双杂系统的特点及优势

  • Dualsystems split-ubiquitin
  • 可检测或筛选跨膜蛋白间互作
  • 根据膜蛋白不同拓扑结构,有多种诱饵载体和猎物载体可供选择
  • 蛋白互作引起转录因子释放,更容易进入核内激活报告基因
  • 报告基因也可以是酶,可简便地通过酶活性检测蛋白的互作
 

服务流程

  • 1.膜蛋白酵母双杂交文库筛选项目评估
  • 2.建库
  • 3.文库验证
  • 4.筛选
 

服务案例

膜蛋白酵母双杂交文库筛选案例展示一:
 
 
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