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核蛋白酵母杂交文库构建

酵母转录因子(GAL4)包括: ①DNA 结合结构域(DBD,识别结合GAL4效应基因上游激活序列UAS) ②转录激活域(AD,与转录机构中的其他成分结合作用启动下游的基因进行转录) 原理:2个结构域彼此分离但为功能必需的结构域,单独作用不能激活转录反应,当二者在空间上充分接近时,则呈现完整的GAL4转录因子活性使启动子下游基因(抗性筛选、蓝白斑筛选、营养缺陷型筛选等)得到转录。

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服务优势

  • 筛选与已知蛋白质特异相互作用的蛋白 ,发现新蛋白及蛋白的新功能。以病原体蛋白筛选与之相互作用的机体蛋白,研究疾病发生、发展、发病机制及开发新的治疗方法。
  • 鉴定/验证两种已知蛋白之间有无相互作用
  • 鉴定已明确有相互作用蛋白质发生作用所必需的的结构域及特定氨基酸的改变对相互作用的影响:利用不同区段表达的蛋白B与正常表达的蛋白A进行相互作用验证,确定二者相互作用结合位点。用于药物筛选等研究,为其提供理论基础。
  • 基因组蛋白连锁图谱绘制 :在BD、AD均接上cDNA库,让它们随机表达蛋白,检测报告基因的表达绘制蛋白质在不同时空状态下相互作用图谱,例如可以预测与癌症相关的基因。
 

服务流程

  • 1.核蛋白酵母杂交文库构建项目评估
  • 2.建库
  • 3.文库验证
  • 4.文库筛选
 

服务案例

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