膜蛋白酵母双杂交文库构建服务
可介导蛋白降解的泛素ubiquitin被分为:①Cub(C端结构域)②Nub(N端结构域):第三位的I被突变为G得到NubG,NubG在bait和prey互作下结构重构,与Cub发生互作。原理: Cub与LexA-VP16转录激活因子连接成Cub-LexA-VP16,当bait-Cub-LexA-VP16与prey-NubG可互作时,Cub与NubG在空间上接近发生重构,被UBPs识别,LexA-VP16被解离进入核内,使启动子下游基因(抗性筛选、蓝白斑筛选、营养缺陷型筛选等)得到转录。
百齐生物技术优势
1、SMART方法与同源重组技术结合构建文库,利用酵母菌株的特点构建文库
2、AbA抗性筛选有效抑制背景生长,大大降低假阳性率
3、文库构建菌株为α型Y187,可简便与a型菌株Y2H Gold结合生长筛选
4、样本需求量低:相比invitrogen而言,大大降低了样本的需求量,尤其对珍贵样本
5、样本中低丰度mRNA损失量低:相比invitrogen,无需转化到大肠杆菌进行文库保存,直接转化酵母菌株
6、invitrogen的Gateway重组技术虽然可简便转换到其他载体,但Clontech次生文库也可通过增加cDNA样本备份达到同样的目的
7、Invitrogen文库构建费用更高
服务内容
1、项目评估
2、建库
3、文库验证
4、文库筛选
服务案例